1、制备1:10样品匀液
称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水水的无菌均质杯内8000 r/min-10000r/min均质1min-2min.或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中。用拍击式均质器拍打1min-2min。制成1:10的样品匀液。
2、制备1:100样品匀液
用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL沿管壁慢慢注入盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头不要触及稀释液面) ,振摇试管或换用支无菌吸管反复吹打使其混合均匀。制成1:100的样品匀液。
3、制备10倍品匀液
按上一步操作程序。制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释1次,换用1次1mL无菌吸管或吸头。
4、取样并制备平板
选择2个-3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液) ,在进行10倍递增稀释时,吸取1mL样品匀液于无菌平皿内,每个释释度做两个平皿。同时,分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内空白对照。
及时将15mL-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46℃士1℃恒温水浴锅中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。
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